在介紹化學發光主要生産工藝流程之前，先和大家老套路先解釋一下原理：化學發光免疫分析（CLIA），是将具有高靈敏度的化學發光測定技術與高特異性的免疫反應相結合，用于各種抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術。化學發光免疫分析包含兩個部分，即免疫反應系統和化學發光分析系統。免疫反應系統是将發光物質（在反應劑激發下生成激發态中間體）直接标記在抗原或抗體上，或酶作用于發光底物。化學發光分析系統是利用化學發光物質經催化劑的催化和氧化劑的氧化，形成一個激發态的中間體，當這種激發态中間體回到穩定的基态時，同時發射出光子，利用發光信号測量儀器測量光量子産額，該光量子産額與樣品中的待測物質的量成正比，由此可以建立标準曲線并計算樣品中待測物質的含量。
然後再聊一下化學發光免疫分析的類型 ：
（一）化學發光标記免疫分析 化學發光标記免疫分析又稱化學發光免疫分析（CLIA），是用化學發光劑直接标記抗原或抗體的免疫分析方法。常用于标記的化學發光物質有吖啶酯類化合物（AE）。（二）化學發光酶免疫分析 從标記免疫分析角度，化學發光酶免疫分析（CLEIA），應屬酶免疫分析，隻是酶反應的底物是發光劑，操作步驟與酶免分析完全相同：以酶标記生物活性物質（如酶标記的抗原或抗體）進行免疫反應，免疫反應複合物上的酶再作用于發光底物，在信号試劑作用下發光，用發光儀進行發光測定。目前常用的标記酶為辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（ALP），它們有各自的發光底物。（三）時間分辨熒光免疫分析（TRFIA） 是用三價稀土離子及其螯合劑作為示蹤物，如铕（Eu3+）、铽（Te3+）及钐（Sm3+）、镝（De3+）等代替傳統的熒光物質、放射性同位素、酶和化學發光物質，來标記抗體、抗原、多肽、激素、核酸探針或生物活性細胞，待反應體系發生後，用時間分辨熒光儀測定最後産物中的熒光強度，根據熒光強度和相對熒光強度比值，判斷反應體系中分析物的濃度，達到定量分析的目的。 （四）電化學發光免疫分析（ECLIA） 是電化學發光（ECL）和免疫測定相結合的産物，是一種在電極表面由電化學引發的特異性化學發光反應，包括了電化學和化學發光二個過程。ECL 反應底物有兩種：三氯聯吡啶钌[Ru（bpy）3]2+、絡合物三丙胺（TPA）。
最後請大家聚精會神，一起學習一下主要生産工藝（以微孔闆載體的化學發光酶免疫分析為例進行描述）
（一）固相載體的制備
1．包被闆的準備 準備經檢驗合格的包被闆，記錄批号、數目、狀态辨別。正常質控項目：尺寸，外觀，包裝。
2．包被液的配制 配制包被緩沖液，加入包被的抗體或抗原至工作濃度，混合均勻，即成所需的包被液，工作濃度的包被液應在規定時間内使用。正常質控項目：包被緩沖液配方，pH值。
3．包被闆的包被 包被液按工藝要求加入包被闆。記錄所包被的包被闆數量。正常質控項目：包被體積，溫度，時間，過程監控。關鍵裝置：包被機、天平、加樣器。
4．洗闆工作液的配制（按各機關工藝要求，可以不洗闆） 按配方配制洗闆工作液。正常質控項目：洗闆工作液配方，pH值。
5．封閉液的配制 按配方配制封閉液。正常質控項目：封閉液配方，pH值。
6．洗闆和封閉 包被完成後，抽去孔内包被液，用洗闆工作液洗闆後（按各機關工藝要求，可以不洗闆），加入封閉液。正常質控項目：封閉體積，溫度，時間，過程監控。關鍵裝置：包被機、洗闆機、天平、加樣器。
7．抽幹 封閉後的反應闆，抽幹孔内液體。正常質控項目：過程監控。
8．幹燥 反應闆應按工藝的要求進行幹燥。正常質控項目：溫度，濕度，時間，過程監控等。
9．密封包裝 将幹燥後的反應闆用鋁箔袋密封包裝，内放幹燥劑（按各機關工藝要求，可以不放）。正常質控項目：密封性能，辨別及效期等。關鍵裝置：包裝機。
10．反應闆（半成品）檢驗 對裝袋密封後的反應闆進行抽樣檢驗。正常質控項目：外觀、闆内變異、闆間變異等。
（二）滴配過程
1．酶結合物（也稱酶标記物）的制備（根據各産品實際情況，該步驟可不進行） 采用正常過碘酸鈉——乙二醇法将相關的抗體（或抗原）标記辣根過氧化物酶（或其他酶），酶标記後的抗體（或抗原）應加入适當的保護劑儲存于低溫。正常質控項目：标記方法，過程控制。
2．酶結合物的鑒定
（1）功能性實驗 将酶結合物用酶稀釋液稀釋後，用于産品的滴配，其結果應符合相關試劑盒的品質标準。
（2）穩定性 将酶結合物用酶稀釋液稀釋，進行2～8℃，及熱穩定性實驗，滴配結果應符合相關試劑盒的品質标準。
3．酶結合物稀釋液 按酶結合物稀釋液的配方配制，存放在2～8℃儲存，并于規定時間内使用。正常質控項目：酶結合物稀釋液配方，pH值。
4．酶結合物工作濃度的滴配 取酶結合物，用酶結合物稀釋液稀釋到不同的濃度，用已制備好的反應闆進行滴配。測定系列标準品及相應的質控品，确定使體系達到最優的酶結合物工作濃度。
5．酶結合物工作液配制 将所需量酶結合物和酶結合物稀釋液按滴配濃度混合均勻。正常質控項目：分裝前檢驗，用配套的反應闆進行檢驗，外觀、靈敏度、質控品測定值、定量産品應作校準品線性檢測。
6．酶結合物工作液的分裝 按工藝要求分裝酶結合物工作液。正常質控項目：分裝前确認試劑名稱、批号、數量，分裝量，封裝後密封性。
7．酶結合物工作液（半成品）檢驗 對分裝後的酶結合物工作液進行抽樣檢驗，外觀、分裝量、靈敏度、校準品劑量-反應曲線線性、質控品測定值。
（三）校準品、陰/陽性對照或質控品的制備
1．稀釋液 按稀釋液的配方配制，存放在2～8℃或-20℃以下儲存，并于有效期内使用。正常質控項目：稀釋液配方，pH值。
2．校準品、陰/陽性對照的配制 校準品、陰/陽性對照品的配制應具有量值溯源性，可參照國家标準品、WHO标準品或其他級别的标準物質進行配制。正常質控項目：分裝前檢驗，準确性、劑量－反應曲線線性（定量産品）、質控品測定值。
3．校準品、陰/陽性對照或質控品的分裝 按工藝要求分裝校準品、陰/陽性對照或質控品。正常質控項目：分裝前确認試劑名稱、批号、數量，分裝量。
4．校準品、陰/陽性對照或質控品（半成品）檢驗 對分裝後的校準品、陰/陽性對照或質控品進行抽樣檢驗，外觀、分裝量、準确性、劑量－反應曲線線性（定量産品）、質控品測定值。
（四）化學發光底物的制備
1．底物緩沖液 按底物緩沖液的配方配制，存放在2～8℃儲存，并于有效期内使用。正常質控項目：底物緩沖液配方，pH值。
2．化學發光底物（氧化劑和發光劑）的配制 分别按氧化劑和發光劑的配方在底物緩沖液中加入相應的氧化劑和發光劑。正常質控項目：氧化劑和發光劑配方。正常質控項目：分裝前檢驗，本底、發光強度。
3．化學發光底物（氧化劑和發光劑）的分裝 按工藝要求分裝化學發光底物（氧化劑和發光劑）。正常質控項目：分裝前确認試劑名稱、批号、數量，分裝量，封裝後密封性。
4．化學發光底物（半成品）檢驗 對分裝後的化學發光底物進行抽樣檢驗，外觀、分裝量、本底、靈敏度、發光強度。
（五）分裝、目檢和貼簽
分裝量用減重稱量法進行測量，把品質換算成體積後進行分裝量的控制。目檢是目測檢查各組分的色澤、分裝量以及是否混濁、有雜質等。
（六）包裝
根據試劑盒包裝SOP要求及說明書的要求，以流水線操作形式進行包裝。包裝時應嚴格檢查品名、批号、裝量，認真核對各物料數量，并在關盒前進行複核。