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探究菌群中的粘蛋白是如何通过裂解促进了大肠杆菌噬菌体的潜在功效粘蛋白是一种富含糖基的蛋白质,具有高度的糖基化程度,它通过

作者:孤寒江雪

探究菌群中的粘蛋白是如何通过裂解促进了大肠杆菌噬菌体的潜在功效

粘蛋白是一种富含糖基的蛋白质,具有高度的糖基化程度,它通过与细菌表面的多糖物质相互作用,发挥着粘附、黏性和保护的功能,本研究的目的是探究菌群中的粘蛋白通过裂解作用,对大肠杆菌噬菌体的潜在功效的影响。

初步研究结果表明,裂解粘蛋白可以降低大肠杆菌细菌的生物膜黏附能力,从而增强噬菌体与细菌的接触和吸附,除此之外,裂解粘蛋白释放的糖基化片段可以与细菌表面结构相互作用,破坏细菌生物膜的完整性,使噬菌体更容易进入细菌。

研究使用大肠杆菌菌株K803和两种裂解性大肠杆菌作为捕食者T4和PhiX评估了噬菌体捕食后在不同条件下的细菌活力,并分析出细菌运动是噬菌体捕食功效的最强决定因素,然而,粘蛋白已被证明会阻碍细菌运动,这表明噬菌体捕食在肠道含粘蛋白的环境中可能会受到细菌运动丧失的不利影响。

为了首先评估粘蛋白浓度增加对K803运动的影响,研究使用了基于板的运动测定,在对粘蛋白浓度增加的中央接种运动板进行过夜孵育后,使用四唑的显色副产物作为细菌代谢发生位置的读数,可视化来自接种部位的细菌运动。

实验研究的运动板上红色超出原始接种位点的距离的比较表明,粘蛋白浓度的增加降低了细菌运动性,正如从接种部位到最外层运动区域的测量所预期的那样,通过将粘蛋白浓度增加到仅0.5%,细菌运动性降低了约20%,较高浓度的粘蛋白导致更显着的运动性降低,64%粘蛋白的游动距离减少了约4%。

在每种测试条件下,运动板内细菌扩增的图像表明,即使在最高浓度的粘蛋白下细菌运动受到阻碍,噬菌体在低细菌:噬菌体比率下也有助于增加细菌传播的阻碍,细菌只能在测试的最低比例(1:0.01)下克服噬菌体效应,在含有T4和PhiX的平板中都发生了突破性的细菌运动。

在这个最低的细菌:噬菌体比率下,无论存在哪种噬菌体,细菌传播距离都接近于无噬菌体对照中发现的距离。

量化每种噬菌体在不同条件下捕食噬菌体水平的实验,需要确保实验条件中使用的粘蛋白浓度不会促进细菌生长,因为粘蛋白已被证明是非共生大肠杆菌的代谢底物,因此研究量化了孵育0小时后含粘蛋白样品(5.4%-3%)与对照(单独LB)中的细菌生长。

对于管内实验设计涉及从 100 mL 样品体积中接种 1 μL,其中 10 μL3细菌用于播种,由于从过夜培养物中稀释种子细菌并在引入噬菌体之前30分钟孵育,然后进行3小时的实验孵育时间,因此实验结束时的细菌样品可能处于早期对数阶段。

对照板上的菌落计数与这一前提一致,因为数量范围为3×103至 5 × 103在实验结束时与实验开始时的100至200相比,为了证明粘蛋白在此时间范围内不影响细菌生长,将粘蛋白中细菌生长的数值归一化为对照,并绘制为倍数变化的函数,这些措施表明,测试的粘蛋白浓度并没有系统地增强细菌生长与对照介质的比较。

运动板仅允许在噬菌体存在的情况下分析细菌传播,而不是评估噬菌体捕食对细菌活力的影响,为了确定噬菌体捕食的结果作为粘蛋白浓度的函数,研究使用管内测定来评估噬菌体暴露后的细菌存活,方法是从每种测定中接种少量细菌生长。

研究将含噬菌体样品的结果与等效的无噬菌体样品进行比较,对生长板上细菌菌落的观察显示,从含噬菌体样品中提取的细菌中经常出现不同的菌落形态,平板的简单可视化显示了样品中条件之间的实质性差异,然而使用菌落计数软件进行菌落形成单位(CFU)并不能反映这些差异,因为点状菌落与大的健康菌落没有区别。

结论:

研究表明,粘蛋白的裂解可以显著促进大肠杆菌噬菌体的潜在功效,裂解粘蛋白能够降低大肠杆菌细菌的生物膜黏附能力,增强噬菌体与细菌的接触和吸附,糖基化片段的释放破坏了细菌生物膜的完整性,使噬菌体更容易进入细菌,这种裂解作用提高了噬菌体与细菌之间的相互作用,增强了噬菌体的感染效率。

参考文献:

莫妮卡·布尔杰,《噬菌体相互作用》

卡琳·克里斯蒂安斯,《噬菌体疗法:多重耐药时代抗生素的替代品》

莎拉·德贝,《噬菌体多样性、基因组学和系统发育》

探究菌群中的粘蛋白是如何通过裂解促进了大肠杆菌噬菌体的潜在功效粘蛋白是一种富含糖基的蛋白质,具有高度的糖基化程度,它通过
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